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        DIGITONIN細胞質膜通透處理液產品說明書中文版

        更新時間:2023-10-24  |  點擊率:509

        MX12860 v.A

         

           DIGITONIN細胞質膜通透處理液產品說明書 

         

        主要用途

         

           DIGITONIN細胞質膜通透處理液是一種旨在通過溫和離子性去垢劑處理,形成膜孔,獲得通透的常用技術方法。方法經過精心研制、成功實驗證明的。主要適用于各種免疫檢測、蛋白和分子轉運等的前處理。產品即到即用,操作簡捷,性能穩定,效果明顯。

         

        技術背景

        細胞質膜通透技術(plasma membrane permeabilization technique )是一種使各種類型細胞的質膜形成孔隙,從而獲得外源性分子進入細胞內部,以控制細胞內的生理活動的實驗技術。通常的通透方法包括電擊通透(electropermeabilization)、去垢劑通透、膜穿孔毒素(pore forming toxin)通透等。其中毛地黃皂苷(digitonin)是一種螺甾烷皂苷(SpirostanSaponin),分子式C56H92O29 溫和的非離子甾類糖苷(steroid glycoside)去垢劑,常用于膜蛋白或受體溶解、線粒體分離、膽固醇定量,以及質膜通透。細胞通透后,形成較大的膜孔,允許較大的分子,例如酶、抗體等導入進細胞內。用于各種檢測,包括免疫檢測,酶活檢測等。

        產品內容

         

          清理液(Reagent A              毫升

          處理液(Reagent B              毫升

        產品說明書                 1

         

        保存方式

         

        保存在20℃冰箱里;有效保證6

         

        用戶自備

         

        2毫升離心管:用于樣品操作的容器

        微型臺式離心機:用于樣品操作

         

        操作步驟

         

        一、 貼壁細胞處理

         

        1. 準備1個細胞培養48孔板的待測細胞,細胞鋪滿率達70

        (注意:可以使用載玻片,載玻片培養皿,35mm培養皿,和其它培養孔板,見注意事項6

        2. 小心抽去細胞培養液

        3. 小心沿著孔壁加入500微升  清理液(Reagent A1個細胞培養孔,覆蓋細胞表面

        4. 小心抽去  清理液(Reagent A

        5. 小心沿著孔壁加入xx微升室溫預熱的  處理液(Reagent B1個細胞培養孔,覆蓋細胞表面

        6. 室溫下孵育10分鐘

        7. 小心抽去  處理液(Reagent B

        8. 小心沿著孔壁加入xx微升  清理液(Reagent A1個細胞培養孔,覆蓋細胞表面

        9. 小心抽去  清理液(Reagent A

        10. 重復實驗步驟89二次

        11. 繼續后續操作

         

        二、懸浮細胞處理

         

        1. 準備1106的待測細胞

        2. 轉移到2毫升離心管

        3. 放進微型臺式離心機離心10分鐘,速度為2000g

        4. 小心抽去細胞培養液

        5. 小心加入xx微升  清理液(Reagent A,混勻細胞顆粒群

        6. 放進微型臺式離心機離心10分鐘,速度為2000g

        7. 小心抽去  清理液(Reagent A

        8. 小心加入xx微升室溫預熱的  處理液(Reagent B,混勻細胞顆粒群

        9. 室溫下孵育10分鐘

        10. 放進微型臺式離心機離心10分鐘,速度為2000g

        11. 小心抽去  處理液(Reagent B

        12. 小心加入xx微升  清理液(Reagent A,混勻細胞顆粒群

        13. 放進微型臺式離心機離心10分鐘,速度為2000g

        14. 小心抽去  清理液(Reagent A

        15. 重復實驗步驟1214二次

        16. 繼續后續操作

         

        注意事項

         

        1. 本產品為20次操作

        2. 本產品可以用于免疫染色的通透處理、受體實驗、轉運實驗等

        3. 操作時,須戴手套

        4. 操作時,避免污染母液

        5. 用戶根據細胞特性,可以稀釋  清理液(Reagent A

        6. 本產品適合各種規格的培養細胞:載玻片,載玻片培養皿,35mm培養皿,和各種培養孔板,須相應調整操作用量:

        操作容器

          處理液(Reagent B操作用量

        載玻片

        100微升

        載玻片培養皿

        1毫升

        35mm培養皿

        1毫升

        96孔培養板

        100微升

        48孔培養板

        200微升

        24孔培養板

        500微升

        12孔培養板

        1毫升

        6孔培養板

        2毫升

        25cm2細胞培養瓶

        3毫升

         

        7. 本公司提供系列質膜通透處理試劑產品

         

        質量標準

         

        1. 本產品經鑒定性能穩定

        2. 本產品經鑒定通透穩定

         

         


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